[发明专利]一种大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的纯化方法有效
| 申请号： | 201910794001.0 | 申请日： | 2019-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN110483634B | 公开（公告）日： | 2021-07-06 |
| 发明（设计）人： | 彭文;张冬冬;胡明敏;梁晓晖;吕荟 | 申请（专利权）人： | 合肥天汇孵化科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/81 | 分类号： | C07K14/81;C07K1/14;C07K1/18;C07K1/34 |
| 代理公司： | 北京市环球律师事务所 11663 | 代理人： | 赵重甲 |
| 地址： | 230000 安徽省合*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的纯化方法，包括以下步骤：S1、ASP干粉溶解；S2、溶解液脱盐；S3、蛋白质层析纯化；S4、浓缩；分别对BBI蛋白组分溶液和KTI蛋白组分溶液进行超滤脱盐与浓缩，得到蛋白浓度50mg/ml的BBI蛋白浓缩液和KTI蛋白浓缩液；S5、蛋白混合；分别在BBI蛋白浓缩液和KTI蛋白浓缩液中加入蛋白总量10％的弱酸性盐，进行混合，使用微米滤器过滤得到半成品制剂；S6、干燥；对半成品制剂进行低温喷雾干燥，控制进风温度为90‑140℃，得到大豆胰蛋白酶抑制剂提取物。本大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的纯化方法，能够对从豆清水中提取出大豆胰蛋白酶抑制剂提取物进行纯化，去除杂质，提高大豆胰蛋白酶抑制剂的纯度，达到药用辅料要求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大豆 胰蛋白酶 抑制剂 粗提物 纯化 方法 | ||
【主权项】：
1.一种大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、ASP干粉溶解；/n将ASP干粉与弱酸性盐缓冲液按照固液比为1:40-60混合，搅拌溶解，得到溶解液；/nS2、溶解液脱盐；/n将溶解液的蛋白质脱盐至溶解液电导率<1mS/cm，调整溶解液的pH值至6-7，过滤后得到纯化上样液；/nS3、蛋白质层析纯化；/n将上样液使用阴离子填料捕获，并用pH值为6-7的弱酸性盐缓冲液和盐梯度为100mmol/L-400mmol/L的NaCl洗脱，分别得到BBI蛋白组分溶液和KTI蛋白组分溶液；/nS4、浓缩；/n分别对BBI蛋白组分溶液和KTI蛋白组分溶液进行超滤脱盐与浓缩，得到蛋白浓度>50mg/ml的BBI蛋白浓缩液和KTI蛋白浓缩液；/nS5、蛋白混合；/n分别在BBI蛋白浓缩液和KTI蛋白浓缩液中加入蛋白总量10％的弱酸性盐，并根据混合比例取用BBI蛋白浓缩液和KTI蛋白浓缩液进行混合，使用微米滤器过滤得到半成品制剂；/nS6、干燥；/n对半成品制剂进行低温喷雾干燥，控制进风温度为90-140℃，得到大豆胰蛋白酶抑制剂提取物。/n
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