[发明专利]用于肺癌检测的DNA甲基化qPCR试剂盒及使用方法在审
| 申请号： | 201910803904.0 | 申请日： | 2019-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN110387421A | 公开（公告）日： | 2019-10-29 |
| 发明（设计）人： | 王志强;万季;潘晓新;夏迪;余涛;金泰庆;罗海燕;蔡雪儿;宋麒 | 申请（专利权）人： | 深圳市新合生物医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京冠和权律师事务所 11399 | 代理人： | 张楠楠 |
| 地址： | 518055 广东省深圳市南山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术和DNA检测技术领域，尤其涉及一种用于肺癌检测的DNA甲基化qPCR试剂盒及其使用方法，具体而言，涉及一种利用血浆游离DNA进行甲基化qPCR以确定一个或多个基因靶点(例如SHOX2和SOX17)的甲基化状态来用于肺癌检测或筛查的试剂盒及其使用方法，经实验测试，本发明试剂盒能够显著提高早期肺癌的阳性检出率和特异性，可将生物标记物的检测灵敏度提高到皮克/纳克级DNA分子，检测灵敏度的提高是通过优化特定核苷酸序列引物及DNA探针以及改进血浆游离DNA的亚硫酸氢盐处理方法来实现的。 | ||
| 搜索关键词： | 肺癌检测 试剂盒 血浆游离DNA 检测灵敏度 亚硫酸氢盐处理 核苷酸序列 甲基化状态 生物标记物 多个基因 发明试剂 实验测试 甲基化 检出率 靶点 筛查 引物 肺癌 生物技术 优化 改进 | ||
【主权项】：
1.一种用于肺癌检测的DNA甲基化qPCR试剂盒，其特征在于：所述试剂盒通过检测或测量受试样品DNA中一种或多种特定基因的甲基化状态或水平来筛查和诊断肺癌，所述试剂盒中包含下述组成部分：(1)用于检测SHOX2基因甲基化状态的特异性引物和探针选自下述三种特异性引物和探针组合中的任一种：特异性引物SEQ ID NO:1‑2和探针SEQ ID NO:3、特异性引物SEQ ID NO:4‑5和探针SEQ ID NO:6、特异性引物SEQ ID NO:7‑8和探针SEQ ID NO:9；(2)用于检测SOX17基因甲基化状态的特异性引物和探针选自下述三种特异性引物和探针组合中的任一种：特异性引物SEQ ID NO:10‑11和探针SEQ ID NO:12、特异性引物SEQ ID NO:13‑14和探针SEQ ID NO:15、特异性引物SEQ ID NO:16‑17和探针SEQ ID NO:18；(3)用于检测ACTB基因甲基化状态的特异性引物SEQ ID NO:19‑20和探针SEQ ID NO:21。
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