[发明专利]结合多交叉置换扩增和金纳米检测肺炎链球菌的方法有效
| 申请号： | 201910806244.1 | 申请日： | 2019-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN110499375B | 公开（公告）日： | 2023-03-28 |
| 发明（设计）人： | 闫琳琳;胡守奎;赵帆;牛莉娜;蔡煜;吴蕾;朱晓雪;高乃姝;农金轻;邢喆 | 申请（专利权）人： | 首钢医院有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/6804;C12Q1/14;C12R1/46 |
| 代理公司： | 北京华沛德权律师事务所 11302 | 代理人： | 马苗苗 |
| 地址： | 100144 北京市石*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及结合多交叉置换扩增和金纳米检测肺炎链球菌的方法，本发明提供的一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测肺炎链球菌的方法，所述多交叉置换扩增MCDA中，含有多条引物，用以识别目标基因片段靶序列的多个区域，并对所述目标基因片段进行所述MCDA反应；在所述扩增引物C1的5’端标记半抗原荧光素，在所述扩增引物D1的5’端标记生物素，获得新标记的扩增引物C1*和D1*；采用所述扩增引物C1*和D1*，在Bst DNA聚合酶、链置换活性DNA聚合酶、其余引物存在下，使用所述目标基因片段作为模板恒温扩增DNA，获得含半抗原荧光素和生物素标记的双标MCDA基因片段；以所述双标MCDA基因片段作为检测物，采用金纳米检测方法对肺炎链球菌进行检测。 | ||
| 搜索关键词： | 结合 交叉 置换 扩增 纳米 检测 肺炎 链球菌 方法 | ||
【主权项】：
1.一种结合多交叉置换扩增和金纳米检测肺炎链球菌的方法，所述多交叉置换扩增MCDA中，含有多条引物，用以识别目标基因片段靶序列的多个区域，并对所述目标基因片段进行所述MCDA反应；所述多条引物包括：一对交叉引物、一对置换引物、6条扩增引物，所述扩增引物包括扩增引物C1和D1，其特征在于，/n在所述扩增引物C1的5’端标记半抗原荧光素，在所述扩增引物D1的5’端标记生物素，获得新标记的扩增引物C1*和D1*；/n采用所述扩增引物C1*和D1*，在Bst DNA聚合酶、链置换活性DNA聚合酶、其余引物存在下，使用所述目标基因片段作为模板恒温扩增DNA，获得含半抗原荧光素和生物素标记的双标MCDA基因片段；所述其余引物为除所述扩增引物C1*和D1*外的所述多条引物；/n以所述双标MCDA基因片段作为检测物，采用金纳米检测方法对肺炎链球菌进行检测。/n
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