[发明专利]人喉白斑上皮细胞三维培养模型的建立方法及其应用有效
申请号: | 201910808332.5 | 申请日: | 2019-08-29 |
公开(公告)号: | CN110484488B | 公开(公告)日: | 2022-04-01 |
发明(设计)人: | 周水洪;敖胤杰;鲍洋洋;钟江涛;陈哲;沈丽芳;喻而;余祺 | 申请(专利权)人: | 浙江大学医学院附属第一医院 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 杨采良 |
地址: | 310006 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明属于细胞培养技术领域,尤其涉及人喉白斑上皮细胞三维培养模型的建立方法及其应用。技术要点主要包括:白斑细胞原代培养;不定期检测细胞增殖;取培养至第三代或第四代的白斑细胞,制成细胞悬液;冰上操作,Matrigel基质胶中加入DMEM培养基制成稀释液,按照稀释液:细胞悬液为2:1的比例混合,得到新的细胞悬液,将新的细胞悬液按照每孔0.6ml加入至24孔板中;将24孔板转移至37℃细胞培养箱中培养12h后,各孔加入DMEM 1ml后继续培养1天即可。本发明在体外成功构建人白斑上皮细胞三维培养模型,构建方法简单,可操作性强,模型状态稳定。三维模型构建,成为二维细胞实验和在体细胞实验的桥梁。 | ||
搜索关键词: | 白斑 上皮细胞 三维 培养 模型 建立 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.人喉白斑上皮细胞三维培养模型的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:/n步骤1:白斑细胞原代培养,取组织块,分离上皮细胞,去除成纤维细胞;/n步骤2:不定期检测细胞增殖;/n步骤3:取培养至第三代或第四代的白斑细胞,消化后制成细胞悬液;/n步骤4:冰上操作,Matrigel基质胶中加入DMEM培养基制成稀释液;/n步骤5:冰上操作,按照稀释液:细胞悬液为2:1的比例混合,得到新的细胞悬液,将新的细胞悬液按照每孔0.6ml加入至24孔板中;/n步骤6:将24孔板转移至37℃细胞培养箱中培养12h后,各孔加入DMEM 1ml后继续培养1天即可。/n
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