[发明专利]血清中L-精氨酸的测定方法

摘要

本发明公开了一种血清中L‑精氨酸的测定方法，属于利用可见光，通过测试反应结果颜色的变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：试剂II中仅有精氨酸酶有效组分，色原物质及其它有效组分同在试剂I中，血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中尿素与试剂Ⅰ反应生成谷氨酸和氧化型NADP⁺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，L‑精氨酸水解生成L‑鸟氨酸和尿素，尿素经反应生成谷氨酸和氧化型NADP⁺，仪器在334nm～340nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的氧化型NADP⁺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的氧化型NADP⁺，计算出L‑精氨酸的含量，本发明不受内源性尿素影响，是一种准确性更高的L‑精氨酸检测方法。

主权项

1.一种血清中L-精氨酸的测定方法，其特征在于试剂Ⅰ中含有α-酮戊二酸、NADPH、谷氨酸脱氢酶、尿素酶等主要成分及适量防腐剂；试剂Ⅱ内仅含有L-精氨酸酶及适量防腐剂；其测定方法为：血清先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，血清中尿素与试剂Ⅰ反应生成谷氨酸和氧化型NADP⁺，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，L-精氨酸水解后生成L-鸟氨酸和尿素，尿素经反应生成谷氨酸和氧化型NADP⁺，仪器在334nm～340nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的氧化型NADP⁺为空白，由试剂Ⅱ反应产生的氧化型NADP⁺计算出L-精氨酸的含量，计算公式为：OD_L-精氨酸 = OD₂ -OD₁×[SV+R₁V₁）/(SV+R₁V₁ +R₂V₂)]/nL-精氨酸浓度= F×OD_L-精氨酸，其中OD_L-精氨酸 是L-精氨酸产生的吸光度，OD₁是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度，OD₂是加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度，SV是血清的体积，R₁V₁是试剂Ⅰ的体积，R₂V₂是试剂Ⅱ的体积，F是校正因数。/n