[发明专利]外周血单个核细胞的分离方法在审
| 申请号： | 201910836499.2 | 申请日： | 2019-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN110551686A | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 何美弟;江嘉豪;王进辉;于莉 | 申请（专利权）人： | 广东唯泰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078 |
| 代理公司： | 44100 广州新诺专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 许英伟 |
| 地址： | 528200 广东省佛山市南海*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种外周血单个核细胞的分离方法，涉及再生医学领域。本发明的分离方法包括以下步骤：预处理：将采集的外周血进行离心，分离上层血液和下层血细胞，将下层血细胞与羟乙基淀粉溶液混合，混合均匀后放置沉降，去除沉降后的上清液，保留下层沉淀；分离：向下层沉淀中加入红细胞裂解液，混合均匀，离心，取细胞沉淀，加入PBS重悬，将细胞悬液加入到淋巴细胞分离液中，离心，去除上清液，保留细胞沉淀，加入PBS、肝素和人血白蛋白，混合，离心，得到PBMC细胞沉淀；培养：用培养基重悬PBMC细胞沉淀，分装至培养瓶中进行培养。采用本发明的方法，分离的外周血单个核细胞的数量多、纯度高、活性高。 | ||
| 搜索关键词： | 下层 沉淀 外周血单个核细胞 血细胞 细胞沉淀 沉降 上清液 重悬 去除 淋巴细胞分离液 羟乙基淀粉溶液 预处理 红细胞裂解液 人血白蛋白 细胞悬液 再生医学 培养基 活性高 培养瓶 外周血 保留 分装 肝素 上层 采集 血液 | ||
【主权项】：
1.一种外周血单个核细胞的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：/n预处理：将采集的外周血进行离心，分离上层血液和下层血细胞，将下层血细胞与羟乙基淀粉溶液混合，混合均匀后放置沉降，去除沉降后的上清液，保留下层沉淀；/n分离：向下层沉淀中加入红细胞裂解液，混合均匀，离心，取细胞沉淀，加入PBS重悬，将细胞悬液加入到淋巴细胞分离液中，离心，去除上清液，保留细胞沉淀，加入PBS、肝素和人血白蛋白，混合，离心，得到PBMC细胞沉淀；/n培养：用培养基重悬PBMC细胞沉淀，分装至培养瓶中进行培养。/n
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