[发明专利]MTHFR和MTRR基因多态性检测引物、探针、试剂盒及应用在审
申请号: | 201910841358.X | 申请日: | 2019-09-06 |
公开(公告)号: | CN110423801A | 公开(公告)日: | 2019-11-08 |
发明(设计)人: | 刘永;吴建榕;孙淼 | 申请(专利权)人: | 北京协和洛克生物技术有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12Q1/6883;C12N15/11 |
代理公司: | 北京市英智伟诚知识产权代理事务所(普通合伙) 11521 | 代理人: | 刘丹妮;姚望舒 |
地址: | 100176 北京市大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种MTHFR和MTRR基因多态性检测引物和探针组合,包括MTHFR C677T、MTHFR A1298C、MTRR A66G基因多态性检测引物与探针组合。本发明还提供了一种MTHFR和MTRR基因多态性的检测试剂盒,所述试剂盒包括以下组分:核酸释放剂,2×PCR反应混合液(包含热启动Taq DNA聚合酶、UDG酶),3组特异性引物,3组特异性探针和内标系统。本试剂盒仅需在常温下对2μl血液样本进行短暂处理便可得到用于多次检测的高质量DNA;检测特异性好,与金标准测序法符合率为100%;灵敏度高,可对0.2ng基因组DNA准确分型;检测流程耗时短,从样本处理到检测结果可在1小时内完成。 | ||
搜索关键词: | 试剂盒 引物 多态性检测 探针组合 基因多态性检测 特异性探针 特异性引物 高质量DNA 基因组DNA 多次检测 核酸释放 检测结果 检测试剂 血液样本 样本处理 测序法 常温下 多态性 金标准 灵敏度 热启动 检测 分型 内标 探针 耗时 应用 | ||
【主权项】:
1.一种MTHFR和MTRR基因多态性检测引物和探针组合,其特征在于,所述组合包括:(1)MTHFR C677T基因多态性检测引物与探针组合:包括核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示的MTHFR C677T上游引物、核苷酸序列为SEQ ID NO:2所示的MTHFR C677T下游引物、核苷酸序列为SEQ ID NO:7所示的MTHFR C677T 677C检测探针、核苷酸序列为SEQ ID NO:8所示的MTHFR C677T 677T检测探针;(2)MTHFR A1298C基因多态性检测引物与探针组合:包括核苷酸序列为SEQ ID NO:3所示的MTHFR A1298C上游引物、核苷酸序列为SEQ ID NO:4所示的MTHFR A1298C下游引物、核苷酸序列为SEQ ID NO:9所示的MTHFR A1298C 1298A检测探针、核苷酸序列为SEQ ID NO:10所示的MTHFR A1298C 1298C检测探针;和(3)MTRR A66G基因多态性检测引物与探针组合:包括核苷酸序列为SEQ ID NO:5所示的MTRR A66G上游引物、核苷酸序列为SEQ ID NO:6所示的MTRR A66G下游引物、核苷酸序列为SEQ ID NO:11所示的MTRR A66G 66A检测探针、核苷酸序列为SEQ ID NO:12所示的MTRR A66G 66G检测探针;其中,所述检测探针的5′端标记有FAM或HEX,3′端标记有NFQ‑MGB。
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