[发明专利]从临床血液中检测单核细胞增生李斯特菌病原菌的方法在审

专利信息
申请号: 201910861059.2 申请日: 2019-09-12
公开(公告)号: CN110423836A 公开(公告)日: 2019-11-08
发明(设计)人: 李敬;王旭;孙宝林;郭建;吴谨 申请(专利权)人: 卓源健康科技有限公司
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/6806;C12Q1/04
代理公司: 合肥顺超知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 34120 代理人: 张芳
地址: 230088 安徽省合肥市高新区望*** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明提供了一种从临床血液中检测单核细胞增生李斯特菌病原菌的方法,包括以下步骤:S1、血液中单核细胞增生李斯特菌基因组DNA的提取;S2、PCR检测:S2.1、利用单核细胞增生李斯特菌基因组DNA序列设计特异性的PCR引物,PCR引物包括如SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.2所示的反向引物;S2.2、以提取的单核细胞增生李斯特菌基因组DNA为模板,采用PCR引物进行PCR扩增;S2.3、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测,扩增出长度为106bp的片段则判定为检测出单核细胞增生李斯特菌病原菌。本发明对血液中单核细胞增生李斯特菌感染的检测极限达到10CFU/mL。本发明实现了对临床血液中单核细胞增生李斯特菌感染的快速灵敏诊断。
搜索关键词: 单核细胞增生李斯特菌 病原菌 临床血液 单核细胞增生李斯特菌感染 检测单核细胞 基因组DNA 李斯特菌 增生 检测 琼脂糖凝胶电泳 基因组DNA序列 血液 反向引物 正向引物 扩增 灵敏 判定 诊断
【主权项】:
1.一种从临床血液中检测单核细胞增生李斯特菌病原菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、血液中单核细胞增生李斯特菌基因组DNA的提取;S2、血液中单核细胞增生李斯特菌PCR检测:S2.1、利用单核细胞增生李斯特菌基因组DNA序列设计一段特异性的PCR引物,该特异性的PCR引物包括如SEQ ID NO.1所示的正向引物和SEQ ID NO.2所示的反向引物;其中,SEQ ID NO.1:5’‑GGGAAATCTGTCTCAGGTGATGT‑3’;SEQ ID NO.2:5’‑CGATGATTTGAACTTCATCTTTTGC‑3’;引物所扩增的目的片段长度为106bp;S2.2、以步骤S1中从血液中提取的单核细胞增生李斯特菌基因组DNA为模板,采用步骤S2.1中的特异性的PCR引物进行PCR扩增;S2.3、对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳及检测,扩增出长度为106bp的片段则判定为检测出单核细胞增生李斯特菌病原菌。
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