[发明专利]一种叶绿体DNA的富集方法在审
| 申请号： | 201910876698.6 | 申请日： | 2019-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN110734907A | 公开（公告）日： | 2020-01-31 |
| 发明（设计）人： | 林芹;龙欢;袁方;陶晔;曾亮;林爱婷 | 申请（专利权）人： | 上海凌恩生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 31260 上海晨皓知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 成丽杰 |
| 地址： | 201800 上海市嘉*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学技术领域，特别涉及一种叶绿体DNA的富集方法。本发明的方法基于植物细胞中的叶绿体DNA与细胞核DNA甲基化位点存在的差异，利用带有蛋白A修饰的磁珠，通过MBD2‑Fc蛋白媒介，将植物基因组DNA中的细胞核DNA和叶绿体DNA进行分离，并进一步实现对叶绿体DNA的富集。利用本发明的方法，在测序前进行叶绿体DNA的富集，然后对富集后的叶绿体DNA进行测序，可有效提高测序数据中叶绿体DNA序列的比例，显著提高测序的准确度、降低测序成本。 | ||
| 搜索关键词： | 叶绿体DNA 测序 富集 细胞核DNA 分子生物学技术 植物基因组DNA 甲基化位点 测序数据 植物细胞 准确度 蛋白A 磁珠 修饰 媒介 | ||
【主权项】：
1.一种叶绿体DNA的富集方法，其特征在于，包括：/n(1)提取植物基因组DNA；/n(2)使蛋白A修饰的磁珠与MBD2-Fc蛋白结合，得到处理后的磁珠；/n(3)将所述植物基因组DNA加入所述处理后的磁珠中，混匀，对混合物进行室温下孵育；/n(4)对孵育后的混合物离心，于磁力架上静置，细胞核DNA通过与磁珠上的MBD2-Fc蛋白结合而附着到磁珠上，叶绿体DNA保留在上清液中，取上清液；/n(5)使用磁珠对所述上清液中的叶绿体DNA进行回收，即得到富集后的叶绿体DNA。/n
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