[发明专利]一种金枪鱼鱼卵卵磷脂制备方法

摘要

本发明关于一种金枪鱼鱼卵卵磷脂制备方法，包括：1)酶解：金枪鱼鱼卵匀浆液中加入蒸馏水和胰蛋白酶酶解，灭活后离心去上清；2)浸提：酶解后的滤饼中加入丙酮，搅拌、抽滤，用丙酮浸提至丙酮不变色；3)二次浸提：浸提后的滤饼中加入无水乙醇，间断微波浸提；4)纯化：以CHCl3‑CH3OH(2:1)混合液为洗脱液将卵磷脂粗品进行硅胶层析柱纯化，收集洗脱液并干燥即得卵磷脂纯品。本方法可加快游离磷脂的萃取速度，提高萃取率，再经硅胶层析柱纯化即得卵磷脂成品，在显著提高卵磷脂提取率的基础上增加纯度，利于其进一步的直接应用，金枪鱼鱼卵卵磷脂可应用于对人肝癌HepG2细胞的抑制及对Chang liver细胞的降脂。

主权项

1.一种金枪鱼鱼卵卵磷脂制备方法，其特征在于：包括以下步骤：/n1)酶解：金枪鱼鱼卵匀浆液中加入蒸馏水，再加入1.8～2.5％的胰蛋白酶酶解，灭活后离心去上清；/n2)浸提：酶解后的滤饼中加入丙酮，25℃磁力搅拌10min，抽滤，用丙酮浸提4～6次，至丙酮不变色；/n3)二次浸提：浸提后的滤饼中加入无水乙醇，维持25～30℃，在提供440～460W功率微波条件下间断微波浸提；/n4)纯化：硅胶层析柱中填充100～200目硅胶，预设静置沉降完成后将含有卵磷脂粗品的CHCl₃-CH₃OH混合溶液上样，以CHCl₃-CH₃OH(2:1)混合液为洗脱液，流速为30～45滴/min对其进行洗脱，收集洗脱液并干燥即得卵磷脂纯品。/n