[发明专利]一种具有延缓骨质流失活性多肽的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种具有延缓骨质流失活性多肽的制备方法，以牡蛎肉为原料，制备牡蛎浆液；依次经过胃蛋白酶酶解、胰酶酶解、乙醇沉淀、减压浓缩及干燥(冷冻干燥或喷雾干燥)，获得具有延缓骨质流失活性的多肽。本发明采用胃蛋白酶和胰酶对牡蛎浆液二次酶解，再使用乙醇除去糖类与蛋白，较好的减少活性多肽再降解，利于保留活性多肽的完整性，防止体内胃肠道酶导致的活性改变或降低；所得多肽对成骨细胞增殖率最高达到168％。通过体内实验证实，本发明开发了牡蛎组织的二次酶解工艺，逐步提高延缓骨质流失活性多肽的纯度，得到了一种具有延缓骨质流失活性的牡蛎多肽产品。所述延缓骨质流失活性多肽可用于预防骨质疏松等相关食品或药品的开发。

主权项

1.一种具有延缓骨质流失活性多肽的制备方法，其特征在于，包括步骤：/nS1、牡蛎浆液的制备：取牡蛎肉，按料液重量比1:3～1:5加水，0～4℃、4000～5000rpm匀浆，每次匀浆时间为1～2min，间歇时间为30～40s，总共匀浆3～5次，得牡蛎浆液；/nS2、牡蛎浆液的一次酶解：将步骤S1所述牡蛎浆液的pH调节到2.0～4.0，加入胃蛋白酶，在温度30～37℃搅拌1～2小时，得酶解液A；其中，所述胃蛋白酶的添加量以所述牡蛎浆液中蛋白质的总含量为基准，每克蛋白质添加胃蛋白酶4500～5000U；/nS3、牡蛎浆液的二次酶解：将步骤S2所述酶解液A的pH调节到6.5～8.2，加入胰酶，在温度30～37℃搅拌1～3小时，得酶解液B；将所述酶解液B离心，取上清液A；其中，所述胰酶的添加量以上述酶解液A中蛋白质的总含量为基准，每克蛋白质添加胰酶4500～5000U；/nS4、乙醇沉淀：取步骤S3所述上清液A，加入其2～4倍体积的无水乙醇，在4～7℃静置24～48h，离心取上清液B；/nS5、旋转蒸发：取步骤S4所述上清液B，置于30℃～45℃进行旋转蒸发至所述上清液B体积的1/10～1/15，得浓缩液；将所述浓缩液干燥，所得干燥的粉末为具有延缓骨质流失活性的多肽；其中，所述干燥为喷雾干燥或冷冻干燥。/n