[发明专利]一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法在审

专利信息
申请号: 201910884933.4 申请日: 2019-09-19
公开(公告)号: CN110590645A 公开(公告)日: 2019-12-20
发明(设计)人: 卢文玉;刘臻;张传波 申请(专利权)人: 天津大学
主分类号: C07D211/88 分类号: C07D211/88
代理公司: 12201 天津市北洋有限责任专利代理事务所 代理人: 曹玉平
地址: 300350 天津市津南区海*** 国省代码: 天津;12
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摘要: 发明公开了一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法,包括如下步骤:(1)将解淀粉芽孢杆菌发酵液离心取上清;萃取,旋蒸,得黄色粘稠物;(2)将黄色粘稠物经大孔树脂层析,用甲醇水溶液洗脱,得到Fr.1‑Fr.3组分;(3)将组分Fr.2和Fr.3合并后使用硅胶柱柱层析,用三氯甲烷:甲醇体系洗脱,共得到Fc.1‑Fc.20;(4)将Fc.17‑Fc.19合并浓缩分离,收集T1;(5)T1冷冻干燥,得到环已酰亚胺固体。本发明发现了解淀粉芽孢杆菌次级代谢产物中存在环已酰亚胺;并且使用大孔树脂对环已酰亚胺进行分离提纯,降低了成本,提高了效率;环已酰亚胺的提取率为65%以上,纯度为91%以上。
搜索关键词: 酰亚胺 解淀粉芽孢杆菌 分离提纯 发酵液 粘稠物 洗脱 次级代谢产物 大孔树脂层析 淀粉芽孢杆菌 甲醇水溶液 大孔树脂 甲醇体系 浓缩分离 三氯甲烷 合并 硅胶柱 柱层析 旋蒸 萃取 发现
【主权项】:
1.一种从解淀粉芽孢杆菌发酵液中分离提纯环已酰亚胺方法,其特征是包括如下步骤:/n(1)将解淀粉芽孢杆菌发酵液离心取上清液;用乙酸乙酯萃取,得乙酸乙酯萃取液;旋蒸除去乙酸乙酯,得黄色粘稠物;/n(2)将所述黄色粘稠物经大孔树脂层析,依次用体积浓度为50%,60%,70%的甲醇水溶液进行洗脱,每个梯度使用4倍柱体积洗脱剂,得到Fr.1、Fr.2、Fr.3组分;/n(3)将200-300目柱层析用硅胶粉用乙酸乙酯浸泡24-28h,装填在硅胶柱中;将组分Fr.2和Fr.3合并后使用硅胶柱柱层析,依次用体积比为(50:1),(20:1),(15:1),(10:1)的三氯甲烷:甲醇体系洗脱,每个梯度使用3倍柱体积洗脱剂,每个梯度依次收集5份洗脱剂,共得到20个组分,依次为Fc.1~Fc.20;/n(4)将Fc.17,Fc.18,Fc.19合并浓缩,通过高效制备液相进行分离,检测器为视差检测器,收集RT=14min的组分为T1;/n(5)将T1冷冻,再用冷冻干燥机冷冻干燥,得到环已酰亚胺固体。/n
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