[发明专利]一种水体粪便污染检测的引物、试剂盒及高通量溯源方法有效
| 申请号： | 201910887484.9 | 申请日： | 2019-09-19 |
| 公开（公告）号： | CN110484637B | 公开（公告）日： | 2020-06-09 |
| 发明（设计）人： | 何席伟;张徐祥;高洁;齐昭栋 | 申请（专利权）人： | 南京大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6848;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 江苏瑞途律师事务所 32346 | 代理人： | 陈彬;蒋海军 |
| 地址： | 210093 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种水体粪便污染检测的引物、试剂盒及高通量溯源方法，检测范围涵盖人类、畜禽类及多种野生动物类粪便污染，属于水体污染检测领域。其主要包括以下步骤：提取待测水样DNA；利用两对扩增线粒体DNA的通用引物对水样DNA进行巢式PCR扩增；将扩增产物进行高通量测序；将测序数据与线粒体DNA数据库进行比对注释，基于比对结果确定水样中存在的粪便污染来源。本发明利用巢式PCR技术对水样中指示粪便污染的线粒体DNA进行扩增，具有极高的灵敏性，采用本发明的通用引物结合高通量测序，不仅能够同时对多种潜在粪便污染进行定性溯源，还能对各类粪便污染的程度进行相对定量，从而确定主要污染源。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 水体 粪便 污染 检测 引物 试剂盒 通量 溯源 方法 | ||
【主权项】：
1.一种水体粪便污染检测的引物，其特征在于：所述引物为巢式PCR扩增序列，所述序列分别为：/nAF(5’-3’):ACTGGGATTAGATACCCCACTATG；/nAR(5’-3’):ACCAGCTATCACCMRGCTC；/nBF(5’-3’):CCCACTATGCYTRGCCCTAAA；/nBR(5’-3’):GTAYRCTTACCWTGTTACGACTT。/n
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