[发明专利]一种活细胞原位检测microRNA-34的基因及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种活细胞原位检测microRNA‑34的基因，涉及基因工程技术领域。本发明所述基因基于DNA立体镊子结构快速原位检测microRNA，能够实现在活细胞内的迅速检测，避免了microRNA提取，逆转录以及PCR等一系列的操作。同时针对microRNA针对疾病诊断特异性较差的现状，原位检测能够很好的实现对microRNA表达异常的细胞的检测，从而明确发生疾病的细胞及组织来源，能够极大地增强microRNA检测的临床意义。在本发明实施例中，对梯度稀释待测microRNA‑34进行检测，检测限达到1.499nm，灵敏度高；同时相较于其他序列相似的microRNA，表现出高度特异性。

主权项

1.一种活细胞原位检测microRNA-34的基因，其特征在于，所述基因由P1、P2、P3、P4、P5和P6组装成立体镊子结构，所述立体镊子结构包括5条边和4个面；所述P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述P3的核苷酸序列如SEQID NO.3所示，所述P4的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述P5的核苷酸序列如SEQ IDNO.5所示，所述P6的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；/n在所述立体镊子结构中，所述P1和P2的结合部分形成固定边1；P1和P3的结合部分连接P1和P5的结合部分形成边2；P2和P3的结合部分连接P2和P5的结合部分形成边3；P2和P4的结合部分连接P2和P6的结合部分形成边4；P1和P4的结合部分连接P1和P6的结合部分形成边5；所述固定边1、边2和边5形成面1，所述固定边1、边3和边4形成面2，所述面1和面2以所述固定边1为轴开合；在所述边2和边3上包括microRNA的结合部。/n