[发明专利]一种通过基因编辑技术提高番茄中番茄红素含量的方法在审
| 申请号： | 201910899703.5 | 申请日： | 2019-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN110499319A | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 汪启明;周池;饶力群;陈苗;朱建华 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/82;A01H5/08;A01H6/82 |
| 代理公司： | 43001 长沙永星专利商标事务所(普通合伙) | 代理人： | 周咏;林毓俊<国际申请>=<国际公布>= |
| 地址： | 410128 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基因编辑技术提高番茄中番茄红素含量的方法，包括以下步骤：分别构建Lcyb1、Lcyb2、CycB和LcyE基因的靶序列T1～T4，然后通过靶序列分别构建其对应的T1sgRNA～T4sgRNA表达盒；将T1sgRNA～T4sgRNA表达盒与crispr/cas9表达载体进行组装，得到重组质粒；利用农杆菌侵染法将重组质粒转化到番茄中，得到番茄新材料，因为新番茄材料中与番茄红素环化酶合成相关基因会存在一个或多个基因的突变，从而抑制番茄红素环化酶的合成，使得新番茄材料的番茄红素含量提高；本发明的方法可实现对一个或多个番茄红素环化酶基因进行编辑，且通过遗传分离可筛选出不含外源载体序列的番茄材料，不存在转基因风险。 | ||
| 搜索关键词： | 番茄材料 番茄 番茄红素环化酶 番茄红素 靶序列 表达盒 构建 番茄红素环化酶基因 合成相关基因 外源载体序列 重组质粒转化 农杆菌侵染 表达载体 多个基因 重组质粒 基因 转基因 突变 组装 合成 遗传 筛选 | ||
【主权项】：
1.一种通过基因编辑技术提高番茄中番茄红素含量的方法，包括以下步骤:/n1)分别构建Lcyb1、Lcyb2、CycB和LcyE基因的靶序列T1～T4，然后通过靶序列分别构建其对应的T1sgRNA～T4sgRNA表达盒；/n2)将步骤1)中的T1sgRNA～T4sgRNA表达盒与crispr/cas9表达载体进行组装，得到重组质粒；/n3)利用农杆菌侵染法将步骤2)中的重组质粒转化到番茄中，得到番茄新材料，因为新番茄材料中与番茄红素环化酶合成相关基因会存在一个或多个基因的突变，从而抑制番茄红素环化酶的合成，使得新番茄材料的番茄红素含量提高；/n其中：T1～T4的核苷酸序列如序列1～4所示。/n
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