[发明专利]免疫健全的滑膜肉瘤异种移植小鼠模型的构建方法及应用

摘要

本发明提供一种免疫健全的滑膜肉瘤异种移植小鼠模型的构建方法，包括P0代的培养：先采集新鲜的滑膜肉瘤患者肿瘤组织块，再在无菌条件下将其移植进免疫缺陷小鼠体内；免疫正常的小鼠经环孢素预处理；Px代的培养：取P0代至Px‑1代中任意一代的小鼠体内生长的肿瘤组织块接种至上述已经由环孢素预处理的小鼠体内，形成Px代小鼠；Py代的培养：取上述Px代至Py‑1代中任意一代小鼠体内生长的滑膜肉瘤肿瘤组织块接种至免疫正常的小鼠体内，至其体内生长出肿瘤组织，即完成所述Py代的培养。本发明改进了传统PDX模型无免疫系统的问题，为肿瘤免疫疗法的研究提供体内模型，拓宽了PDX模型的应用范围。

主权项

1.一种免疫健全的滑膜肉瘤异种移植小鼠模型的构建方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：/n步骤一、P0代的培养：先采集滑膜肉瘤患者肿瘤组织块，再在无菌条件下将新鲜的患者肿瘤组织块异种移植进免疫缺陷小鼠体内，所述异种移植包括选用年龄在2～6周的免疫缺陷小鼠，小鼠性别与患者性别保持一致，将采集到的新鲜的患者肿瘤组织块浸泡在含胎牛血清的无菌孵育液中，小鼠麻醉后固定，将患者肿瘤组织块植入小鼠体内，缝合切口，养育小鼠使得其肿瘤生长；所述异种移植包括皮下移植或原位移植；可选地将P0代免疫缺陷小鼠体内生长的滑膜肉瘤肿瘤组织块接种至另一免疫缺陷小鼠体内，形成P1代荷瘤免疫缺陷小鼠；可选地将P1代荷瘤免疫缺陷小鼠体内生长的滑膜肉瘤肿瘤组织块接种至另一免疫缺陷小鼠体内，形成P2代荷瘤免疫缺陷小鼠；以此类推；/n步骤二、免疫正常的小鼠经环孢素预处理：在免疫正常的小鼠体内注入含环孢素的注射液或让免疫正常的小鼠食用含环孢素的饮食；/n步骤一和步骤二可以任意先后完成，但均需要在步骤三之前完成；/n步骤三、Px代的培养：Px代中的x为大于等于1的自然数，取P0代至Px-1代中任意一代的荷瘤免疫缺陷小鼠体内生长的滑膜肉瘤肿瘤组织块接种至步骤二中制备的已经由环孢素预处理的小鼠体内，形成Px代荷瘤小鼠；可选地将Px代荷瘤小鼠体内生长的滑膜肉瘤肿瘤组织块接种至另一只步骤二中制备的已经由环孢素预处理的小鼠体内，形成Px+1代荷瘤小鼠；可选地将Px+1代荷瘤小鼠体内生长的滑膜肉瘤肿瘤组织块接种至另一只步骤二中制备的已经由环孢素预处理的小鼠体内，形成Px+2代荷瘤小鼠；以此类推；/n步骤四、Py代的培养：Py代中的y为大于等于x+1的自然数，取步骤三中Px代至Py-1代中任意一代的荷瘤小鼠体内生长的滑膜肉瘤肿瘤组织块接种至免疫正常的小鼠体内，养育该免疫正常的小鼠，至其体内生长出滑膜肉瘤肿瘤组织，即完成所述Py代的培养。/n