[发明专利]基于免疫双标记胶体金探针与杂交链式扩增检测单增李斯特菌的试剂盒和应用及检测方法有效
| 申请号： | 201910901386.6 | 申请日： | 2019-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN110564816B | 公开（公告）日： | 2022-12-20 |
| 发明（设计）人： | 范龙兴;苑帅;朱昱霖 | 申请（专利权）人： | 天津一安生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/682 | 分类号： | C12Q1/682;C12Q1/6804;C12Q1/689;C12Q1/06;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京思创大成知识产权代理有限公司 11614 | 代理人： | 高爽 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新区经济技*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明属于食品安全检测免疫分析技术领域，涉及一种基于免疫双标记胶体金探针与杂交链式扩增检测单增李斯特菌的试剂盒和应用及检测方法。该试剂盒包括：(1)包被抗单增李斯特菌单克隆抗体的微孔条；(2)双标记胶体金探针；所述双标记胶体金探针由巯基标记的单链扩增引发探针与抗单增李斯特菌多克隆抗体包被胶体金得到；(3)DNA扩增探针；(4)反应缓冲液；所述反应缓冲液为含有链霉亲和素标记辣根过氧化物酶的三羟基氨基甲烷盐酸盐缓冲液；(5)单增李斯特菌标准品；(6)微孔洗涤液；(7)化学发光底物液。本发明的试剂盒采用单多抗夹心目标物的方法，与竞争检测方法相比，灵敏度更高、检测线性范围更宽、检测成本较低。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 免疫 标记 胶体 探针 杂交 链式 扩增 检测 李斯特 试剂盒 应用 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于免疫双标记胶体金探针与杂交链式扩增检测单增李斯特菌的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括盒体以及置于盒体内的：/n(1)包被抗单增李斯特菌单克隆抗体的微孔条；/n(2)双标记胶体金探针；所述双标记胶体金探针由巯基标记的单链扩增引发探针与抗单增李斯特菌多克隆抗体包被胶体金得到；/n(3)DNA扩增探针；包括3’端具有生物素标记的第一发卡DNA和5’端具有生物素标记的第二发卡DNA；所述第一发卡DNA包括5’端突出的第一识别序列和茎环结构，所述第二发卡DNA包括3’端突出的第二识别序列和茎环结构，所述第一发卡DNA的茎部配对部分与第二发卡DNA的茎部配对部分的序列相同，所述第一发卡DNA的第一识别序列与第二发卡DNA的环部序列完全互补，所述第二发卡DNA的第二识别序列与第一发卡DNA的环部序列完全互补，并且，所述第一发卡DNA的5’端碱基序列与单链扩增引发探针中至少一部分互补配对；/n(4)反应缓冲液；所述反应缓冲液为含有链霉亲和素标记辣根过氧化物酶的三羟基氨基甲烷盐酸盐缓冲液；/n(5)单增李斯特菌标准品；/n(6)微孔洗涤液；/n(7)化学发光底物液。/n
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