[发明专利]一种纤维素及石油烃降解细菌的分离方法在审
| 申请号： | 201910910605.7 | 申请日： | 2019-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN110628671A | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 宫春杰;王崇鞠 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02 |
| 代理公司： | 42104 武汉开元知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王和平 |
| 地址： | 430068 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及微生物分离技术领域，尤其涉及纤维素及石油烃降解细菌的分离方法。纤维素及石油烃降解细菌的分离方法，包括步骤：(1)富集培养：取常年落有草木、秸秆、落叶的森林土壤，采用浓度梯度法接种于富集培养基上，培养直至出现单菌落，转移至羧甲基纤维素为唯一碳源平板上进行纯化，直至出现单菌落；(2)复筛：将单菌落在羧甲基纤维素为唯一碳源平板上连续传代；(3)定向筛选：单菌落转移至以微晶纤维素粉为唯一碳源平板上，直至出现单菌落，连续传代；(4)原油降解细菌目标筛选：将单菌落通过平板划线法转移至原油平板上，培养至单菌落出现；(5)菌种鉴定：扩增单菌落的16SrDNA，将16SrDNA比对鉴定，比对后为细菌菌属的保留。 | ||
| 搜索关键词： | 单菌落 唯一碳源 羧甲基纤维素 石油烃降解 细菌 连续传代 纤维素 比对 微生物分离技术 富集培养基 浓度梯度法 平板划线法 微晶纤维素 定向筛选 富集培养 菌种鉴定 目标筛选 森林土壤 细菌菌属 原油降解 复筛 扩增 落叶 接种 草木 秸秆 原油 保留 | ||
【主权项】：
1.一种纤维素及石油烃降解细菌的分离方法，包括步骤：/n(1)富集培养：取常年落有草木、秸秆、落叶的森林土壤溶于葡萄糖与羧甲基纤维素混合水溶液中制成土壤悬液，将土壤悬液采用浓度梯度法接种于富集培养基上，培养直至出现单菌落，将单菌落采用平板划线法转移至羧甲基纤维素为唯一碳源的培养基平板上进行纯化，直至出现单菌落；/n(2)复筛：将步骤(1)得到的单菌落在羧甲基纤维素为唯一碳源的培养基平板上连续转移传代3～5次，至菌落稳定生长；/n(3)定向筛选：将步骤(2)得到的单菌落转移至以微晶纤维素粉为唯一碳源培养基平板上，直至出现单菌落，连续传代3～5次，至菌落稳定生长；/n(4)原油降解细菌目标筛选：将步骤(3)得到的单菌落通过平板划线法转移至原油培养基平板上，培养至单菌落出现，将原油培养基平板上生长的单菌落传代5代，稳定遗传的菌株保存至-80℃待用；/n(5)菌种鉴定：扩增步骤(4)得到的单菌落的16SrDNA，将16SrDNA通过BLAST与EZbiocloud比对鉴定，比对后为细菌菌属的保留，其他真菌菌属舍弃。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于湖北工业大学，未经湖北工业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910910605.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一株异养硝化菌及其应用
- 下一篇：一种石油烃降解菌的培养基及高密度发酵方法
