[发明专利]一种高产L-赖氨酸枯草芽孢杆工程菌的构建方法及应用在审
| 申请号： | 201910922020.7 | 申请日： | 2019-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN110591996A | 公开（公告）日： | 2019-12-20 |
| 发明（设计）人： | 史慧玲;夏树立;韩静;冯婧;张蕾;陈龙宾 | 申请（专利权）人： | 天津市畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/29;C12N15/75;C12P13/08;C12R1/125 |
| 代理公司： | 12207 天津市杰盈专利代理有限公司 | 代理人： | 朱红星 |
| 地址： | 300381 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高产L‑赖氨酸枯草芽孢杆工程菌的构建方法及应用。根据GenBank辣椒CDS序列设计引物，以辣椒cDNA为模板，PCR克隆辣椒高赖氨酸基因CFLR，并将其插入穿梭表达载体pHT43，构建质粒pHT43‑CFLR。然后将含有启动子和终止子表达框Pgac‑CFLR‑rrnBT1T2插入到新构建的pK18mobsacB‑ΔALA中获得目的重组质粒pK18mobsacB‑ΔALA::CFLR。再将重组性质粒pK18mobsacB‑ΔALA::CFLR转化到枯草芽孢杆菌中,经过细胞内同源交换和培养基筛选，获得不带质粒抗性标记的高产L‑赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC（B）63501/pK18mobsacB‑ΔALA::CFLR。结果表明，重组菌株L‑赖氨酸含量比野生菌株提高了34.89%，具有良好的应用潜力。 | ||
| 搜索关键词： | 赖氨酸 辣椒 构建 枯草芽孢杆菌株 穿梭表达载体 枯草芽孢杆菌 培养基筛选 高赖氨酸 构建质粒 抗性标记 枯草芽孢 设计引物 野生菌株 应用潜力 重组菌株 重组质粒 表达框 工程菌 含量比 启动子 终止子 质粒 同源 克隆 细胞 基因 转化 交换 应用 | ||
【主权项】：
1.一种高产L-赖氨酸枯草芽孢杆工程菌，其特征在于所述基因工程菌为不带质粒抗性标记的高产L-赖氨酸枯草芽孢杆菌株CMCC（B）63501/pK18mobsacB-ΔALA ::CFLR。/n
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