[发明专利]一种无损鉴定单性态禽类早期性别的PCR方法在审
| 申请号： | 201910930382.0 | 申请日： | 2019-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN110616257A | 公开（公告）日： | 2019-12-27 |
| 发明（设计）人： | 秦清明;李治利;易先国;张自富;赵云焕;赵瑜;朱忠珂 | 申请（专利权）人： | 信阳农林学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6879 | 分类号： | C12Q1/6879;C12Q1/6888;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 41162 郑州明华专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 高丽华 |
| 地址： | 464000 河南省信阳*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于禽类早期性别鉴定技术领域，具体涉及一种无损鉴定单性态禽类早期性别的PCR方法。该方法通过采集早期禽类的含有羽髓的羽毛，通过简洁高效的方法对DNA进行提取，以提取的DNA为模板采用PCR扩增引物进行PCR扩增，然后将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，扩增结果为单条带则判定为雄性，双条带则判定为雌性。本发明的方法与现有的方法相比提取的DNA浓度和纯度均明显较高，而且效果也明显优于其他方法，整体操作步骤简单、使用试剂少、耗费时间短、鉴定效果好，适用于大批量性别鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 禽类 判定 琼脂糖凝胶电泳检测 早期性别鉴定 鉴定效果 扩增产物 性别鉴定 整体操作 单条带 扩增 条带 无损 羽毛 采集 | ||
【主权项】：
1.一种无损鉴定单性态禽类早期性别的PCR方法，其特征在于：包括以下步骤：/n(1)采集单性态禽类1-2根含有羽髓的羽毛；/n(2)将羽毛中的羽髓置于无菌EP管中，加入80μL 0.2mol/L的NaOH，涡旋混匀，于95℃条件下加热5-10min，再加入200μL无水乙醇，涡旋混匀，12000r/min离心3min，弃上清；/n再次加入200μL无水乙醇，涡旋混匀，12000r/min离心3min，弃上清，风干待乙醇完全挥发，加入100μL TE溶液溶解，涡旋混匀，获得基因组DNA样品，将基因组DNA样品进行稀释，于-20℃保存备用；/n(3)以提取的DNA为模板，采用PCR扩增引物进行PCR扩增；/n(4)将PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，扩增结果为单条带则判定为雄性；扩增结果为双条带则判定为雌性。/n
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