[发明专利]一种测定磷酸甘油酸激酶活性的方法有效
| 申请号： | 201910941437.8 | 申请日： | 2019-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN110779887B | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 胡汛;金呈朦;吴昊 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | G01N21/33 | 分类号： | G01N21/33;G01N21/64 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 赵杭丽 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种测定磷酸甘油酸激酶活性的方法，通过测定PGK催化BPG和ADP向3‑PG和ATP正向转化的速率。本发明的正向反应更加彻底，测定的线性范围更大，反应速率更快，测定时间更短，因此相对于测定逆向反应的方法，测定正向反应可以在更加微量的样本中检测PGK的活性，具有更大的实用价值。本方法最终产生ATP，因而可以偶联荧光素酶读取ATP产生的量来测定活性，从而适应多功能酶标仪荧光检测，可以扩大样本检测通量，降低检测限。适用于检测微量样本及高通量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 测定 磷酸甘油酸 激酶 活性 方法 | ||
【主权项】：
1.一种测定磷酸甘油酸激酶活性的方法，其特征在于，通过以下步骤实现：/n(1)第一步反应：向石英比色杯中加入1ml反应缓冲液，再依次加入10μL、100mM 3-磷酸甘油醛至终浓度1mM，5μL、200mM烟酰胺腺嘌呤二核苷酸至终浓度1mM，混匀溶液后，在紫外分光光度计上340nm吸光度读数归零，再加入1个酶活力单位的3-磷酸甘油醛脱氢酶，持续记录A
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