[发明专利]一种青蛤寡肽的制备方法有效
申请号: | 201910973803.8 | 申请日: | 2019-10-14 |
公开(公告)号: | CN110759968B | 公开(公告)日: | 2021-10-22 |
发明(设计)人: | 杨最素;余方苗;唐云平;黄芳芳;陈艳 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人: | 尉伟敏 |
地址: | 316022 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及从青蛤中制备短肽的技术领域,为进一步提供青蛤寡肽的提取效率,本发明提供一种青蛤寡肽的制备方法,将离子液体EMIMBF4与γ‑丁内酯按体积比1:1复配二元体系应用在青蛤寡肽的制备上,并在‑50‑60℃低温下引入脉冲电场,结束后在前期优化的木瓜蛋白酶酶解条件下酶解处理,所得青蛤寡肽的提取率得到提高,而且生物活性也有一定程度的提高。 | ||
搜索关键词: | 一种 寡肽 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种青蛤寡肽的制备方法,所得青蛤寡肽的氨基酸序列为Ile-Leu-Tyr-Met-Pro,其特征在于,包括以下步骤:/n(1)将新鲜的青蛤洗净后、去壳,取内脏,清洗干净后匀浆处理得到青蛤匀浆液;/n(2)将青蛤匀浆液与复配溶剂按料液比1:2~4混合均匀获得浸泡液,所用复配溶剂为离子液体EMIMBF4与γ-丁内酯按体积比1:1混合制成;/n(3)降低浸泡液温度至-50~-60℃,向浸泡液中通入脉冲电场处理,然后升至室温;/n(4)离心分离步骤(3)处理后的浸泡液,回收上清液,去离子水洗涤固体并离心分离得到内脏破碎物;/n(5)向内脏破碎物中加入木瓜蛋白酶溶液处理得到酶解液,灭酶活性,离心分离;/n(6)将步骤(5)中离心分离后的上清液经滤膜过滤后,超滤膜处理,截留分子量小于3kDa的分子段产物得到粗肽液;/n(7)将粗肽液经层析分离,收集MIT法抑制率最高的峰对应的组份,然后经HPLC分离纯化,收集MIT法抑制率最高的峰对应的组份,冷冻干燥,得到青蛤寡肽。/n
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