[发明专利]一种普适性的mRNA体外环化方法有效
| 申请号： | 201910977683.9 | 申请日： | 2019-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN112662659B | 公开（公告）日： | 2022-08-19 |
| 发明（设计）人： | 朱斌;余兵兵;夏恒;黄锋涛;成锐;吴慧;陆雪玲;闫艳 | 申请（专利权）人： | 武汉核圣生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 徐瑛 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市东湖新技术*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种普适性的mRNA体外环化方法，步骤为：制备纯化的mRNA；对mRNA的5’端进行单磷酸化修饰，并在3’端加上poly(A)；将修饰后的mRNA与DNA splint杂交；向杂交反应体系中加入T4DNA连接酶进行环化；消化体系中多余的DNA splint，然后对环化产物进行验证；其中所述DNA splint的长度为60nt，且其5’端为30nt的poly(T)，3’端为30nt的可与修饰后的mRNA的5’端互补配对的碱基。本发明的有益效果是:(1)在mRNA的3’端加上了poly(A)，便于DNA splint的序列设计和mRNA两端缺口对齐，增强了mRNA的体外环化效率，利于后续翻译过程；(2)采用腺苷三磷酸双磷酶对mRNA的5’端进行单磷酸化修饰增强了环化效率；(3)T4 DNA连接酶的酶促方法没有底物差异性，具有普适性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 普适性 mrna 体外 环化 方法 | ||
【主权项】：
暂无信息
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉核圣生物技术有限公司，未经武汉核圣生物技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910977683.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种用于干化污泥的电动分料装置
- 下一篇：折叠式烘干机
