[发明专利]一种痤疮丙酸杆菌生物膜的构建培养方法在审
| 申请号： | 201911003973.X | 申请日： | 2019-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN110684689A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 马英;贺轶轩;卢忠;杨勤萍;吴旸 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属华山医院 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/01 |
| 代理公司： | 31200 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;陆尤 |
| 地址： | 200040 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明属于微生物技术领域，具体为一种痤疮丙酸杆菌生物膜的构建培养方法。本发明方法包括：称取BHI干粉、酵母提取物、葡萄糖；将它们加入水中，搅拌均匀制得BHI Sup.培养基；将冻存的痤疮丙酸杆菌菌株融化后在血平板上划线种菌，所得菌落接种于布氏琼脂肉汤，用振荡培养箱在厌氧环境下振荡培养；用离心管收集培养出的菌体，离心，弃上清后使用布氏琼脂肉汤重悬菌体；将重悬后的菌体使用BHI Sup.培养基体外培养，得到痤疮丙酸杆菌生物膜。该生物膜的生物量、膜内活菌数量、膜结构均优于现有常规培养基。本发明有效解决了由于痤疮丙酸杆菌生长条件严苛，且生长速率慢，体外构建其生物膜较为困难等问题。 | ||
| 搜索关键词： | 痤疮丙酸杆菌 生物膜 肉汤 布氏琼脂 菌体 微生物技术领域 葡萄糖 常规培养基 酵母提取物 振荡培养箱 菌落接种 生长条件 体外构建 厌氧环境 有效解决 振荡培养 重悬菌体 培养基 离心管 膜结构 生物量 血平板 干粉 称取 冻存 构建 活菌 菌株 水中 重悬 划线 融化 生长 | ||
【主权项】：
1.一种痤疮丙酸杆菌生物膜的构建培养方法，其特征在于，具体步骤如下：/n步骤1：准备原料，称取35-40gBHI干粉，3-7g的酵母提取物；/n步骤2：配置培养基，将35-40g BHI干粉、3-7g酵母提取物溶于0.8-1.2L水中，再加入葡萄糖配制成1%葡萄糖溶液，混合搅拌均匀，制得培养基，记为BHI Sup.培养基，调整培养基pH值为7.0；/n步骤3：复苏种菌，将冻存的痤疮丙酸杆菌菌株于室温下融化，然后在血平板上划线种菌，待细菌复苏后接种于布氏琼脂肉汤，菌株的OD600nm均调整为0.08-0.12，使用振荡培养箱在振荡转速200-300rpm环境下35-38℃厌氧培养110-140h；/n步骤4：重悬菌体，使用无菌离心管收集培养出的菌体，采用离心机处理，离心转速4000-6000rpm，时间5-8min，吸弃上层清液不用，然后使用布氏琼脂肉汤重悬菌体，调整OD600nm值至0.9-1.1；/n步骤5：菌种培养，将重悬后的菌体以1:（100-200）比例使用BHI Sup.培养基进行稀释，然后加入96孔板，200ul／孔，37℃厌氧培养120h。/n
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于复旦大学附属华山医院，未经复旦大学附属华山医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201911003973.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
