[发明专利]一种链式NK细胞的培养方法在审
申请号: | 201911008852.4 | 申请日: | 2019-10-23 |
公开(公告)号: | CN110643573A | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 孔德照;陈杰;方松刚 | 申请(专利权)人: | 武汉济源高科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 430073 湖北省武汉市东湖高新技术*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开一种链式NK细胞的扩增培养方法,包括如下步骤:培养NK细胞前,先提前用单克隆抗体CD56、CD16,以及细胞因子IL‑21、IL‑15包被培养瓶/皿,培养当天收集人外周血、脐血、骨髓等来源的单个核细胞,采用自体细胞饲养层与因子组合2步链式激活,以后根据细胞生长情况及时补液并于第5天添加因子组合再次激活。本发明在前5天内期可以获得高基数活化的高表达CD3—CD56+的NK细胞,通过14天的扩增培养可以获得大量高纯度的自然杀伤NK细胞,能够满足临床治疗肿瘤的需求。 | ||
搜索关键词: | 扩增培养 链式 激活 临床治疗肿瘤 单个核细胞 单克隆抗体 人外周血 细胞生长 细胞因子 自然杀伤 自体细胞 高表达 高纯度 高基数 培养瓶 饲养层 包被 补液 活化 脐血 骨髓 | ||
【主权项】:
1.一种链式NK细胞的培养方法,其特征在于,培养过程包括如下步骤:提前用抗体和细胞因子包被培养瓶,培养第1天先进行细胞第1步激活,3h后进行细胞因子组合刺激培养,再3h后进行细胞第2步激活,以后每天根据细胞密度添加培养基扩大培养,第5天时添加细胞因子组合继续培养,直至培养至第14天。/n
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