[发明专利]人纤维蛋白体外降解方法有效
| 申请号： | 201911011555.5 | 申请日： | 2019-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN110684817B | 公开（公告）日： | 2021-07-20 |
| 发明（设计）人： | 丁重辉;李博华;胡晓娟;杨娟 | 申请（专利权）人： | 北京赛科希德科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;G01N33/96 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 温可睿 |
| 地址： | 102206 北京市昌平区科学*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及生化检测技术领域，尤其涉及人纤维蛋白体外降解方法。本发明对纤维蛋白采用过滤研磨的方式进行前处理，将制备的纤维蛋白在机械剪切力的作用下形成均一，细小的颗粒状，方便后续纤溶酶的降解。并且通过控制加入纤溶酶的量，以及在纤溶结束后，迅速离心获得上清后，通过添加一定量的冻干配方，制成冻干品可以长期稳定保存1年以上。另外经实验证实，本发明方案中的参数下能够获得更稳定的降解产物，相对于其他参数具有更明显的优势。 | ||
| 搜索关键词： | 纤维蛋白 体外 降解 方法 | ||
【主权项】：
1.人纤维蛋白体外降解方法，包括：/n将人纤维蛋白以Tris缓冲液重悬，搅拌10～20min后，弃除液体进行研磨；/n所述研磨的产物以Tris降解缓冲液重悬，加入纤溶酶，37℃，100rpm摇床酶解；/n所述酶解的产物经4000rpm离心30min取上清，与2×冻干缓冲液混合，进行赋值后冻干，制得人纤维蛋白降解产物；/n所述Tris降解缓冲液包括：50mM Tris-HCl，0.9％的NaCl，0.1％苯甲酸钠，pH值为8.5；/n所述2×冻干缓冲液包括：Hepes 4wt％、海藻糖1g/L、牛白蛋白70g/L、甘露醇40g/L、苯甲酸钠0.2wt％，pH值为7.6～7.8；/n所述冻干的程序为：0～3h，20℃→-50℃；3h～4h，保持-50℃；4h～6h，-50℃→-25℃；6h～12h，保持-25℃；12h～16h，-25℃→0℃；16h～17h，0℃→25℃；25℃保持。/n
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