[发明专利]脐带间充质干细胞的分离纯化方法在审
申请号: | 201911030969.2 | 申请日: | 2019-10-28 |
公开(公告)号: | CN110643572A | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 江嘉豪;何美弟;李静静;赵蓝 | 申请(专利权)人: | 广东唯泰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 44100 广州新诺专利商标事务所有限公司 | 代理人: | 许英伟 |
地址: | 528200 广东省佛山市南海*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种脐带间充质干细胞的分离纯化方法,属于干细胞与再生医学技术领域。该方法,包括以下步骤:分离脐带组织:取脐带组织,清洗去除血液,剪碎为组织碎片,备用;组织消化:取上述组织碎片,加入组织消化液震荡消化;所述组织消化液中含有中性蛋白酶、透明质酸酶、胶原酶II和DNA酶;消化结束后加入终止液终止,过滤,得未消化的组织块和滤液,将滤液离心去除上清获得细胞;细胞培养:将上述组织块和细胞接种于培养瓶中,以无血清培养基进行培养,获得所述脐带间充质干细胞。上述脐带间充质干细胞的分离纯化方法,针对常规技术中酶消化法和组织块培养法的不足,能够在三至五天内得到足够的原代细胞。 | ||
搜索关键词: | 脐带间充质干细胞 消化 分离纯化 脐带组织 组织碎片 消化液 组织块 细胞培养 无血清培养基 组织块培养法 透明质酸酶 中性蛋白酶 胶原酶II 离心去除 酶消化法 细胞接种 原代细胞 再生医学 干细胞 培养瓶 终止液 剪碎 去除 备用 过滤 清洗 震荡 血液 细胞 | ||
【主权项】:
1.一种脐带间充质干细胞的分离纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:/n分离脐带组织:取脐带组织,清洗去除血液,剪碎为组织碎片,备用;/n组织消化:取上述组织碎片,加入组织消化液震荡消化;所述组织消化液中含有中性蛋白酶、透明质酸酶、胶原酶II和DNA酶;消化结束后加入终止液终止,过滤,得未消化的组织块和滤液,将滤液离心去除上清获得细胞;/n细胞培养:将上述组织块和细胞接种于培养瓶中,以无血清培养基进行培养,获得所述脐带间充质干细胞。/n
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