[发明专利]西伯利亚鲟全长脂联素蛋白基因原核表达的方法及应用在审
申请号: | 201911035632.0 | 申请日: | 2019-10-29 |
公开(公告)号: | CN110684793A | 公开(公告)日: | 2020-01-14 |
发明(设计)人: | 李志琼;唐妮;徐少奇;李娅;刘晏伶;王美;陈虎;汪斌;田正志;张鑫;周朝伟;陈德芳;王艳;杨淞;赵柳兰 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/11;C12N15/12;C07K14/46;G01N33/68;A23K50/80;A23K20/147 |
代理公司: | 51229 成都正华专利代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 李蕊 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明公开了一种西伯利亚鲟全长脂联素蛋白基因原核表达的方法及应用,包括:(1)脂联素成熟肽的克隆;(2)重组质粒的构建;(3)重组质粒诱导表达。本发明的方法使西伯利亚鲟脂联素蛋白能够在原核生物内实现大批量、低成本生产,最后可用于功能验证等注射试验及添加剂。 | ||
搜索关键词: | 脂联素 西伯利亚 重组质粒 低成本生产 蛋白基因 功能验证 诱导表达 原核表达 原核生物 注射试验 成熟肽 构建 可用 添加剂 蛋白 克隆 应用 | ||
【主权项】:
1.一种西伯利亚鲟全长脂联素蛋白基因原核表达的方法,其特征在于,包括:/n(1)成熟肽基因的克隆:根据全长脂联素蛋白的氨基酸序列,设计分别带有BamHI酶切位点和HindⅢ酶切位点的上下游引物,进行PCR扩增,得到目的核苷酸片段;/n(2)重组质粒的构建:将原核表达载体与目的核苷酸片段进行重组,构成能表达出氨基酸序列的重组质粒;/n(3)重组质粒诱导表达:将重组质粒导入表达菌株中,并利用诱导剂诱导重组质粒在表达菌株中表达。/n
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