[发明专利]一种以脂肪酸为原料利用大肠杆菌工程菌制备α，β不饱和脂肪酸的方法有效
| 申请号： | 201911038194.3 | 申请日： | 2019-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN110684794B | 公开（公告）日： | 2021-08-20 |
| 发明（设计）人： | 苏静;王芬;王瑞明;李岩;王丽;汪俊卿;袁海波;杨晓慧 | 申请（专利权）人： | 齐鲁工业大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/53;C12N15/52;C12N15/60;C12N15/55;C12N1/21;C12P7/64;C12R1/19 |
| 代理公司： | 济南竹森知识产权代理事务所(普通合伙) 37270 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 250353 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种利用大肠杆菌工程菌制备α，β不饱和脂肪酸的方法，该方法通过过表达该路径上的FadE、FadD和ydii基因，同时敲除FadR和FadB基因，阻断了β氧化的影响和细胞调控子的调控，优化反‑2‑癸烯酸表达途径，获得了大肠杆菌工程菌，并利用该工程菌通过优化转化过程中的相关条件，显著提高反‑2‑癸烯酸的转化率，可进一步用于10‑羟基‑2‑癸烯酸的生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪酸 原料 利用 大肠杆菌 工程 制备 不饱和 方法 | ||
【主权项】：
1.一种大肠杆菌工程菌的构建方法，其特征在于，步骤如下：/n(1)构建重组质粒petDuet-FadE、重组质粒pet28a-sumo-YdiI；/n所述酯酰辅酶脱氢酶FadE的表达基因核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示；酯酰CoA硫酯酶基因ydiI的核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示；/n(2)利用步骤(1)制得的重组质粒petDuet-FadE,构建petDuet-FadE-FadD质粒；脂酰CoA合成酶基因FadD的核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示；/n(3)利用RED重组法敲除基因，构建基因缺失ΔFadRB菌株(以下将同时敲除FadR和FadB的工程菌缩写为ΔFadRB)；/n(4)取步骤(1)、(2)制得的重组质粒pet28a-sumo-YdiI和petDuet-FadE-FadD质粒共转化到基因缺失ΔFadRB的菌株，制得重组菌YED-ΔFadRB的菌株。/n
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