[发明专利]一株高产L-缬氨酸的基因工程菌及发酵生产L-缬氨酸方法有效
| 申请号： | 201911043318.7 | 申请日： | 2019-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN110607268B | 公开（公告）日： | 2021-05-25 |
| 发明（设计）人： | 谢希贤;刘晓倩;郝亚男;门佳轩;刘益宁;李旋;田道光;文晨辉;熊博 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P13/08;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭晓迪 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一株高产L‑缬氨酸的基因工程菌，从大肠杆菌W3110出发，在其基因组上整合了枯草芽孢杆菌的乙酰乳酸合酶基因alsS并使其强表达；并在其基因组上整合了大肠杆菌ppGpp 3′‑焦磷酸水解酶突变体R290E/K292D基因spoT并使其强表达；并敲除其基因组上乳酸脱氢酶基因ldhA、丙酮酸甲酸裂解酶I基因pflB和富马酸还原酶四个亚基的基因frdA、frdB、frdC、frdD；并将大肠杆菌的支链氨基酸转氨酶基因ilvE替换为枯草芽孢杆菌的亮氨酸脱氢酶基因bcd；并将大肠杆菌的乙酰羟酸异构还原酶基因ilvC替换为突变体L67E/R68F/K75E的编码基因。本发明还改进了L‑缬氨酸发酵方法，采用双阶段溶氧控制，提高了L‑缬氨酸产率和糖酸转化率。 | ||
| 搜索关键词： | 高产 缬氨酸 基因工程 发酵 生产 方法 | ||
【主权项】：
1.一株高产L-缬氨酸的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌从大肠杆菌W3110出发，在其基因组上整合了枯草芽孢杆菌的乙酰乳酸合酶基因alsS并使其强表达；并在其基因组上整合了大肠杆菌ppGpp 3′-焦磷酸水解酶突变体R290E/K292D基因spoT并使其强表达；并敲除其基因组上乳酸脱氢酶基因ldhA、丙酮酸甲酸裂解酶I基因pflB和富马酸还原酶四个亚基的基因frdA、frdB、frdC、frdD；并将大肠杆菌的支链氨基酸转氨酶基因ilvE替换为枯草芽孢杆菌的亮氨酸脱氢酶基因bcd；并将大肠杆菌的乙酰羟酸异构还原酶基因ilvC替换为具有L67E/R68F/K75E突变的乙酰羟酸异构还原酶突变体基因，构建基因工程菌。/n
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