[发明专利]用中国仓鼠卵巢细胞表达外源蛋白时信号肽的选择方法及应用有效
申请号: | 201911052154.4 | 申请日: | 2019-10-31 |
公开(公告)号: | CN110760541B | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
发明(设计)人: | 常惠芸;孙振文;邵军军;张永光 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;G01N33/68;C07K19/00 |
代理公司: | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人: | 时亚娟 |
地址: | 730000 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明涉及用中国仓鼠卵巢细胞表达外源蛋白时信号肽的选择方法及应用,属于生物技术领域。本发明采用信息分析技术,对29种在CHO细胞中常用的高分泌表达信号肽和外源蛋白串联序列进行分析,最终选择分析结果合适的10种信号肽,通过PCR方法将10种不同的分泌型信号肽与串联表位基因的5’端相连,分别构建了真核表达载体并转染哺乳动物细胞CHO,采用Western blot检测CHO培养基中重组表位蛋白的累积差异,结果证明蛋白累计差异与本方法选择结果相符合,从而证明了所述方法的可行性。 | ||
搜索关键词: | 中国 仓鼠 卵巢 细胞 表达 蛋白 信号肽 选择 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.用中国仓鼠卵巢细胞表达外源蛋白时信号肽的选择方法,其特征在于:首先选取能在中国仓鼠卵巢细胞中高分泌表达蛋白的信号肽作为待选择信号肽;将待选择信号肽分别与外源目的蛋白进行串联,获得重组蛋白;通过信号肽分析工具分析重组蛋白的氨基酸序列,选择切割位点分析准确的重组蛋白序列上的信号肽,即为适合外源目的蛋白外分泌表达的信号肽。/n
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