[发明专利]一种β-葡萄糖苷酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 201911058974.4 | 申请日： | 2019-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN110577947B | 公开（公告）日： | 2022-10-18 |
| 发明（设计）人： | 杨峰;张振雷;王晓军;李文娟;庞金蕙 | 申请（专利权）人： | 广西师范大学 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/70;C12P33/20 |
| 代理公司： | 桂林市华杰专利商标事务所有限责任公司 45112 | 代理人： | 杨雪梅 |
| 地址： | 541004 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种β‑葡萄糖苷酶突变体及其应用，通过全质粒PCR对原有野生型Bacillus cereus W23Q的β‑葡萄糖苷酶进行定点突变，制备单突变体库；采用PCR体系和程序进行全质粒PCR，结束后采用Dpn I酶消除模板，再将质粒转化到大肠杆菌Top10中，培养提取质粒保存并送测序；确定突变成功后，将质粒转化到表达宿主大肠杆菌BL21中，培养、诱导表达，即得到β‑葡萄糖苷酶突变体。该突变体较野生酶能大幅度提高催化Rg3转化Rh2的效率。应用该菌种生产Rh2，能降低成本，便于工业化应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄 糖苷酶 突变体 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种β-葡萄糖苷酶突变体，其特征在于：所述β-葡萄糖苷酶突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，氨基酸序列如 SEQ ID NO:2所示，或者为SEQ ID NO:2所示氨基酸序列经以下至少一种突变情况所得：/n将第197位的丙氨酸A突变为天冬氨酸D，简称A197D；/n或/和将第246位的缬氨酸V突变为天冬氨酸D，简称V246D；/n或/和将第295位的天冬氨酸D突变为天冬酰胺N，简称D295N；/n或/和将第304位的酪氨酸Y突变为苯丙氨酸F，简称Y304F；/n或/和将第360位的天冬酰胺N突变为天冬氨酸D，简称N360D；/n或/和将第489位的异亮氨酸I突变为缬氨酸V，简称I489V。/n
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