[发明专利]基于荧光定量PCR技术的快速检测大肠杆菌含量的方法在审
| 申请号： | 201911075976.4 | 申请日： | 2019-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN110747284A | 公开（公告）日： | 2020-02-04 |
| 发明（设计）人： | 高恶斌 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/19 |
| 代理公司： | 32341 南京中律知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 沈振涛 |
| 地址： | 212000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 基于荧光定量PCR技术的快速检测大肠杆菌含量的方法。本发明以大肠杆菌LacZ基因为检测靶基因，通过化学合成方法合成得到一定质量的具有多个核苷酸的标准靶序列，将一定质量的靶序列所含分子数量，定量后稀释得到LacZ基因系列浓度标准品，以LacZ基因系列浓度标准品和待测样品DNA为模板，利用特异性引物进行实时荧光定量PCR，绘制标准曲线，通过标准曲线和待测样品的Ct值判定结果。同时，根据大肠杆菌LacZ基因特异性片段序列设计并合成一组特异性引物，优化PCR反应条件，建立以实时荧光定量聚合酶链反应为平台的检测方法，并对所建立的方法进行评估。 | ||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 特异性引物 标准曲线 待测样品 浓度标准 靶序列 实时荧光定量聚合酶链反应 合成 大肠杆菌LacZ基因 实时荧光定量PCR 荧光定量PCR 特异性片段 化学合成 快速检测 判定结果 序列设计 靶基因 核苷酸 检测 稀释 绘制 评估 优化 | ||
【主权项】：
1.基于荧光定量PCR技术的快速检测大肠杆菌含量的方法，其特征在于：方法步骤：/n(一)制备LacZ基因系列浓度标准品：/n以大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因LacZ基因为检测靶基因，通过化学合成方法合成得到一定质量的具有多个核苷酸的标准靶序列SEQ ID NO.1，根据n＝(m/M)N
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