[发明专利]一种人血红蛋白的制备方法在审
申请号: | 201911101100.2 | 申请日: | 2019-11-12 |
公开(公告)号: | CN110642941A | 公开(公告)日: | 2020-01-03 |
发明(设计)人: | 徐德红;徐琳;黄红萍;田根根;殷维 | 申请(专利权)人: | 武汉光谷新药孵化公共服务平台有限公司 |
主分类号: | C07K14/805 | 分类号: | C07K14/805;C07K1/34 |
代理公司: | 31253 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人: | 周琼 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖开发区高新大道*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种人血红蛋白的制备方法,具体包括以下步骤:S1、血液的选取:首先从医院或医疗机构收取过期人血,S2、血浆的去除,S3、血红蛋白的释放,S4、基质的除去,S5、血红蛋白的纯化,本发明涉及生物工程技术领域。该人血红蛋白的制备方法,可实现既快速又高效的制备出高纯度人血红蛋白,同时很好的实现了将过期的人血进行回收利用,来提取人血红蛋白,避免了过期人血的直接丢弃造成资源的浪费,大大简化了制备工艺,且提升了制备人血红蛋白的纯度,无需花费工作人员大量的工作时间进行分离和纯化,减轻了工作人员的工作负担,大大提高了工作人员的工作效率,从而大大方便了人们人血红蛋白的制备。 | ||
搜索关键词: | 人血红蛋白 制备 血红蛋白 人血 过期 生物工程技术领域 分离和纯化 工作负担 工作效率 回收利用 医疗机构 制备工艺 高纯度 基质 去除 血浆 丢弃 血液 释放 | ||
【主权项】:
1.一种人血红蛋白的制备方法,其特征在于:具体包括以下步骤:/nS1、血液的选取:首先从医院或医疗机构收取过期人血,然后通过称量设备量取所需体积的过期人血,备用;/nS2、血浆的去除:将步骤S1量取的过期人血倒入离心设备中,然后以转速为400-500r/min,温度为25-31℃的条件下旋转离心10-20min,之后沉淀30-40min,即可完成将过期人血中的红细胞分离出来,然后采用缓冲液系统将分离出来的红细胞洗涤2-3次,能够去除血浆蛋白和部分膜磷脂;/nS3、血红蛋白的释放:经过步骤S2得到堆积的血红细胞后,先把红细胞置于肾透析仪中,再倒入低渗溶液中透析1-2h,使红细胞逐断膨胀以至膜破裂,然后再将透析后的混合溶液转移至0,lμm的超滤制备中,从而过滤出血红蛋白溶液;/nS4、基质的除去:将步骤S3得到的血红蛋白溶液转移至离心设备内,在10000-36000g的离心力下,离心时间为30-120min,除去红细胞膜及膜碎片基质,然后分类上清液,将所得的上清液依次过0.45和0.2pm滤膜以除去更小的基质和病菌,之后使用pH调节剂调节pH和盐离子浓度;/nS5、血红蛋白的纯化:用100kd的滤膜或病毒滤器过滤,以起到脱磷脂或病毒的作用,再通过凝胶排阻层析柱对血红蛋白溶液进行分离,即可得到血红蛋白纯品。/n
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