[发明专利]以非诊断为目的基于GC-MS精子计数的检测方法有效
| 申请号： | 201911110723.6 | 申请日： | 2019-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN110699418B | 公开（公告）日： | 2023-06-06 |
| 发明（设计）人： | 曾桥;胡西陵;陈继勇 | 申请（专利权）人： | 浙江星博生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N30/02 |
| 代理公司： | 合肥兆信知识产权代理事务所(普通合伙) 34161 | 代理人： | 孟祥龙 |
| 地址： | 315040 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明属于分析化学及临床医学领域，具体为以非诊断为目的基于GC‑MS精子计数的检测方法，包括：阶段一：研究对象选择和分组依据；阶段二：样本制作；阶段三：样本上机和阶段四：数据分析，本发明目的：1.建立基于GC‑MS的血清中二甲戊灵暴露的检测方法；2.将二甲戊灵暴露作为精子计数降低的效应标志物进行应用；3.开发用于血清中的二甲戊灵暴露检测的诊断试剂盒，本发明提供的血清中二甲戊灵暴露检测可在早期通过微创方式预测精子计数降低的风险，相较于精液采集更为省时方便，可对育龄男性的精子计数进行早期筛查，为临床医生进一步深入检查提供依据。 | ||
| 搜索关键词： | 诊断 目的 基于 gc ms 精子 计数 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.基于GC-MS精子计数的检测方法和应用，其特征在于：包括以下阶段：/n阶段一：研究对象选择和分组依据；/n阶段二：样本制作；/n阶段二包括以下步骤：/n步骤1：血清蛋白的沉淀，取0.5mL血清样本，加入0.5mL饱和硫酸铵，涡旋震荡30s以上，溶液温度4℃，离心转速16000rpm，离心15min后，另取一只EP管，转移离心后的上层清液；/n步骤2：固相萃取，首先，小柱活化取小柱，向小柱中加入3mL甲醇，待自然流尽后，再加入3mL超纯水，待自然流尽，备用，然后上样，将步骤1中EP管上层清液溶液全部转移至已活化的小柱中，控制流速，自然流尽，进一步的除杂，样本自然流尽后，小柱中加入1mL超纯水，自然流尽后，用真空泵-20psi抽干15min，除去萃取柱中残留的水相，最后样本收集用15mL离心管替换废液收集管，小柱中加入4mL洗脱液，待自然流尽后，再加入4mL正己烷，待自然流尽，用真空泵-20psi抽10min，此时待测物已收集至该离心管；/n步骤3：浓缩，首先将收集的样品溶液氮吹浓缩，氮吹至近干，氮吹近干后，加入200μL二氯甲烷溶液，涡旋震荡1min，涡旋后全转移至装有200μL内插管的棕色样本瓶中，待液体自然挥干，加入20μL乙酸乙酯溶液复溶，待测；/n阶段三：样本上机，GC-MS开机之后抽真空等其稳定，上机检测；/n阶段四：数据分析。/n
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