[发明专利]胶质瘤细胞中高效特异表达的自杀基因腺病毒及构建方法在审
| 申请号： | 201911171025.7 | 申请日： | 2019-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN110964747A | 公开（公告）日： | 2020-04-07 |
| 发明（设计）人： | 王浩;项威;胡继良;潘建青;王俊 | 申请（专利权）人： | 深圳市人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12N15/65;C12N15/54;A61P35/00 |
| 代理公司： | 广州京诺知识产权代理有限公司 44407 | 代理人： | 肖金艳 |
| 地址： | 518000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 一种胶质瘤细胞中高效特异表达的自杀基因腺病毒及构建方法，其特征在于，腺病毒通过下述方法构建，使用PCR方法克隆c‑fos基因启动子片段，将其连接到腺病毒表达载体上，在c‑fos启动子下游连接自杀基因及miR‑128互补序列，构建出腺病毒重组表达载体；将腺病毒重组表达载体转染293细胞，待细胞有出毒迹象时，收集病毒上清，利用病毒上清将病毒扩增至P3代，其后用腺病毒纯化试剂盒纯化病毒。本发明通过将miR‑128互补序列放在自杀基因的下游，正常细胞高表达miR‑128，而miR‑128互补序列可沉默miR‑128表达的目的，从而可对自杀基因在正常细胞中的表达发挥抑制效果，而胶质瘤细胞中miR‑128表达缺失，自杀基因可以在胶质瘤细胞中大量转录，从而能够进一步提高自杀基因在胶质瘤细胞中的靶向性，实现了自杀基因在胶质瘤细胞中高效且特性性的表达。 | ||
| 搜索关键词： | 胶质 细胞 高效 特异 表达 自杀 基因 病毒 构建 方法 | ||
【主权项】：
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