[发明专利]一种L-苏氨酸转醛酶突变体的高通量快速筛选方法在审

专利信息
申请号: 201911342288.X 申请日: 2019-12-23
公开(公告)号: CN110904188A 公开(公告)日: 2020-03-24
发明(设计)人: 林娟;许炼;王力超;许鑫琦;陈承滔;赖凌燕 申请(专利权)人: 福州大学;福建昌生生物科技发展有限公司
主分类号: C12Q1/48 分类号: C12Q1/48;C12Q1/32
代理公司: 福州旭辰知识产权代理事务所(普通合伙) 35233 代理人: 程勇
地址: 350116 福建省福州市*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明公开了一种L‑苏氨酸转醛酶突变体的高通量快速筛选方法,属于生物化学和酶工程领域。本发明取乙醛及乙醇脱氢酶反应液,随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况,计算OD340nm下降的平均反应速率VOD340nm,以乙醛浓度为自变量x,VOD340nm为因变量y,得到回归方程y=ax,以及乙醛标准曲线。转醛反应液、L‑苏氨酸转醛酶突变体全细胞反应液,充分混匀反应结束后,离心除去细胞沉淀,取上清液和乙醇脱氢酶反应液,随即置于酶标仪中检测OD340nm随时间的变化情况,计算OD340nm下降的平均速率VOD340nm;通过VOD340nm计算得到反应液中乙醛的浓度,以乙醛浓度的高低来筛选L‑苏氨酸转醛酶突变体。本发明不受反应液中的杂质干扰,灵敏度和准确性高,重复性好,操作简便,便于推广应用。
搜索关键词: 一种 苏氨酸 转醛酶 突变体 通量 快速 筛选 方法
【主权项】:
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