[发明专利]一种梨PMEI蛋白体外表达的方法及其应用有效
申请号: | 202010041241.6 | 申请日: | 2020-01-15 |
公开(公告)号: | CN111139257B | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
发明(设计)人: | 吴巨友;朱晓璇;汤超;王鹏;张绍铃 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/29;C12P21/02;C07K14/415;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C12N5/04;A01N47/44;A01P21/00;C12R1/19 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;李晓峰 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种梨PMEI蛋白的体外表达纯化方法及其应用。通过设计引物克隆梨PMEI基因;构建大肠杆菌重组表达质粒PMEI‑pCold‑TF;将构建的重组表达质粒PMEI‑pCold‑TF转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,构建梨PMEI蛋白重组表达菌株;对重组菌株进行蛋白诱导表达,并用镍柱亲和层析法纯化重组梨PMEI蛋白;之后,用获得的重组梨PMEI蛋白处理梨花粉管及拟南芥根部。通过本发明的方法,实现了梨PMEI蛋白的首次体外表达及纯化,表达效率高,纯化蛋白稳定存在且纯度完全可以满足相关实验的需要;通过重组梨PMEI蛋白对梨花粉管和拟南芥根部的处理,促进了梨花粉管和拟南芥根部的生长。 | ||
搜索关键词: | 一种 pmei 蛋白 体外 表达 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
暂无信息
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