[发明专利]一种基于实时荧光定量PCR检测土壤真菌数量的方法在审

专利信息
申请号: 202010063983.9 申请日: 2020-01-19
公开(公告)号: CN111057751A 公开(公告)日: 2020-04-24
发明(设计)人: 刘兵;曲朝磊;马阳;徐杰;刘怡;杨艺红;孙辉 申请(专利权)人: 南京林业大学
主分类号: C12Q1/6851 分类号: C12Q1/6851;C12Q1/06;C12R1/645
代理公司: 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 代理人: 邱兴天
地址: 210037 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于实时荧光定量PCR检测土壤真菌数量的方法,属于土壤真菌数量检测领域。本发明公开的方法主要包括:称取过筛的新鲜土壤,利用试剂盒提取土壤总DNA,统一稀释到一定浓度;将生长适度的模板射纹革菌的菌丝利用CTAB法提取总DNA,制备成标准曲线系列模板DNA溶液;将标准曲线或待测土壤模板DNA溶液构建qPCR反应体系,包括根据真菌18S核糖体rRNA保守序列设计的通用qPCR引物;利用ABI7500实时荧光定量PCR仪进行qPCR反应;绘制出标准曲线;计算每克干土中真菌数量。本发明提供的检测土壤真菌数量的方法,操作安全简便,引物序列特异性好,灵敏度高,结果精准可靠,重现性好。
搜索关键词: 一种 基于 实时 荧光 定量 pcr 检测 土壤 真菌 数量 方法
【主权项】:
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