[发明专利]一种靶向乙型肝炎病毒的改造的CRISPR/SaCas9系统及其应用

摘要

本发明公开了一种靶向乙型肝炎病毒的改造的CRISPR/SaCas9系统及其应用。根据CRISPR的gRNA的设计原则及不同基因型HBV序列的保守性区域，筛选3条gRNA并构建在PX601表达载体上，同时选择不同肝脏特异性启动子与HBV病毒基因组的增强子进行组合，筛选出2个启动子组合对表达载体PX601进行改造。在细胞模型和小鼠模型中利用上述gRNA指导的CRISPR改造系统，可以在显著提升SaCas9的肝组织表达特异性的同时，有效的抑制乙型肝炎病毒基因的表达和复制。该系统易于操作、安全性高、对HBV复制的抑制效率高。该改造的CRISPR/SaCas9系统有望成为治疗乙型肝炎病毒新型治疗药物。