[发明专利]一种大规模回收线性化质粒的方法在审
| 申请号： | 202010174168.X | 申请日： | 2020-03-13 |
| 公开（公告）号： | CN111424030A | 公开（公告）日： | 2020-07-17 |
| 发明（设计）人： | 孔维娟;宋彦凌;董庸行 | 申请（专利权）人： | 常州艾米能斯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 常州市英诺创信专利代理事务所(普通合伙) 32258 | 代理人： | 王美华 |
| 地址： | 213000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种大规模回收线性化质粒的方法，包括如下步骤：步骤1，限制性内切酶酶切，线性化质粒在酶切体系中的浓度为0.6～1.7μg/μl，限制性内切酶为PvuI酶，用量为每1μg质粒使用0.2～0.4μl的PvuI酶进行酶切；步骤2，酚氯仿异丙醇抽提；步骤3，醇沉获得线性化质粒。本发明酶切体系，以PvuI酶酶切，并控制酶切体系中线性化质粒浓度0.6～1.7μg/μl，辅以酚氯仿异丙醇抽提和醇沉，将线性化质粒的回收率提高至92％以上，甚至超过95％，将传统的质粒回收率至少提高30％。此外，本发明的质粒回收方法适用于大规模质粒回收。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大规模 回收 线性化 质粒 方法 | ||
【主权项】：
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