[发明专利]筛选绵羊肺炎支原体和山羊支原体山羊肺炎亚种血清学阴性羊的iELISA方法有效

专利信息
申请号: 202010178953.2 申请日: 2020-03-15
公开(公告)号: CN111323602B 公开(公告)日: 2021-09-14
发明(设计)人: 储岳峰;吴娅琴;颜新敏;郝华芳;陈胜利;马丽娜;刘永生 申请(专利权)人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/543
代理公司: 青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙) 37236 代理人: 王巧丽
地址: 730046 甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要: 发明公开了一种筛选绵羊肺炎支原体和山羊支原体山羊肺炎亚种血清学阴性羊的iELISA方法,包括如下步骤:(1)将山羊支原体山羊肺炎亚种1801菌株接于MTB培养基中扩培后,菌液离心、灭菌、PBS超声重悬,分离得到抗原;(2)用所述抗原包被酶标板,37℃温箱1h后4℃过夜;加入封闭液,37℃封闭2h;加入200倍稀释的血清样品,37℃孵育1h;加入用5%脱脂奶粉稀释5000倍的兔抗羊二抗,37℃孵育1h;(3)用PBST洗板后加入TMB显色液,37℃孵育10min;加入终止液终止反应;酶标仪读取OD450nm值。本发明iELISA方法敏感性可达98%,操作简单,样本处理量大,不仅可用于Mccp和Mo两种病原血清学阴性羊的筛选,还可用于实验中Mccp抗体水平的监测。
搜索关键词: 筛选 绵羊 肺炎 支原体 山羊 血清学 阴性 ielisa 方法
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