[发明专利]一种登革病毒通用型RT-RAA-LFD扩增引物及检测方法在审
申请号: | 202010200620.5 | 申请日: | 2020-03-20 |
公开(公告)号: | CN111334610A | 公开(公告)日: | 2020-06-26 |
发明(设计)人: | 穆小萍;罗娅莎;熊玉锋;赖科峰;叶青;郑淑华;郭军飞 | 申请(专利权)人: | 广东省妇幼保健院 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12Q1/6804;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 陈洁娣;莫瑶江 |
地址: | 510010 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种登革病毒通用型RT‑RAA‑LFD扩增引物及检测方法。本发明针对1~4型登革病毒的3'端非翻译区共同保守区域,设计了一对使用于RAA技术的特异性引物,正、反向引物的5'端分别用6‑羧基荧光素和生物素进行标记,这使得阳性的双链扩增产物的两端分别被标记上FAM和生物素。再利用包被了胶体金标记的抗FAM抗体和链霉亲和素的侧向流试纸,通过免疫层析法对扩增结果进行肉眼可视的判读,摆脱了对荧光定量仪器的依赖,最低检测浓度为10个拷贝/μL,与黄病毒科的其他病毒无交叉反应。将该扩增引物和方法用于临床样本,可成功检测出登革病毒RNA,与荧光定量PCR检测结果的一致性达到96%。 | ||
搜索关键词: | 一种 病毒 通用型 rt raa lfd 扩增 引物 检测 方法 | ||
【主权项】:
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