[发明专利]靶向高危型HPV高频整合位点处人基因组序列的sgRNA和HaCaT细胞模型的制备在审
| 申请号： | 202010324328.4 | 申请日： | 2020-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN111662904A | 公开（公告）日： | 2020-09-15 |
| 发明（设计）人： | 汪辉;马丁;任慈;丁文成;李晓敏;熊劲风 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学同济医学院附属同济医院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/11;C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人： | 胡镇西;冯超 |
| 地址： | 430030 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种靶向高危型HPV高频整合位点处人基因组序列的sgRNA和HaCaT细胞模型的制备。本发明针对HPV16在13q22和HPV18在8q24区域的整合位点分别设计特异性的sgRNA，并得到sgRNA双链DNA，将sgRNA双链引物分别与CRISPR/Cas9载体连接获得sgRNA表达载体，筛选得到sgRNA打靶质粒；运用克隆构建及PCR扩增分别合成含有高危型人乳头状瘤病毒HPV基因的线性Donor片段，与sgRNA打靶质粒共转染HaCaT细胞，获得HPV基因定点整合的HaCaT细胞模型。本发明运用CRISPR/Cas技术建立的HPV16及HPV18在人基因组高频位点整合的细胞模型，促进了HaCaT细胞的生长增殖，为高危型HPV整合在宫颈癌发病中的机制研究提供新的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 靶向 高危 hpv 高频 整合 位点处人 基因组 序列 sgrna hacat 细胞 模型 制备 | ||
【主权项】：
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