[发明专利]一种定量miRNA的测序文库制备和分析方法有效
| 申请号： | 202010367164.3 | 申请日： | 2020-04-30 |
| 公开（公告）号： | CN112126986B | 公开（公告）日： | 2023-07-18 |
| 发明（设计）人： | 李华;沈益行;郭子文;谢跃华 | 申请（专利权）人： | 苏州京脉生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/6806;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 江苏昆成律师事务所 32281 | 代理人： | 刘尚轲 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州市吴江区盛泽镇*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 为了解决miRNA的精确定量问题，本发明提供一种定量miRNA的测序文库制备和分析方法，其主要步骤包括在RNA两端连接衔接子RA5与RA3；使用反转录引物RT Primer获得DNA第一链并对溶液进行不同倍数的稀释；使用Primer1和Primer2进行PCR并对扩增产物中目的DNA片段进行切胶回收；使用Illumina测序平台进行测序；使用生物信息学工具分析下机数据并使用算法校正miRNA的表达量。本发明设计的包含随机标签序列的衔接子RA5能有效去除PCR扩增带来的重复序列，实现对miRNA进行更为精准的表达定量；本发明提出的稀释法以及对应的算法，有效避免了因miRNA的不同拷贝连接上同样的随机标签序列而造成表达量低估的情况，因此进一步提高了定量的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 定量 mirna 序文 制备 分析 方法 | ||
【主权项】：
暂无信息
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