[发明专利]一种具有多等位基因p53编码序列的重组腺病毒的制备方法在审
| 申请号： | 202010386150.6 | 申请日： | 2020-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN111534546A | 公开（公告）日： | 2020-08-14 |
| 发明（设计）人： | 迪奥斯达·德鲍蒂斯塔;徐卫 | 申请（专利权）人： | 赛诺（深圳）生物医药研究有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C07K14/47;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 深圳市卓科知识产权代理有限公司 44534 | 代理人： | 赵辉丽;潘晓 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区粤海街道*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 一种具有多等位基因p53编码序列的重组腺病毒的制备方法，包括有如下步骤：采用寡核苷酸的第一DNA接头修饰pUC18质粒，并将含有p53表达盒的片段克隆至修饰后质粒中，然后分别采用第二DNA接头及第三DNA接头修饰后得到的两种质粒进行匹配产生具有p53等位基因双拷贝的中间质粒，将中间质粒中的SpeI‑SalI片段导入至穿梭质粒中，获得p53等位基因双拷贝的穿梭质粒将穿梭质粒pSTL‑TDMp53(1+2)采用Pme1酶切使之线性化，然后和伙伴pAdEasy质粒一起通过电穿孔导入进宿主细菌，通过宿主细菌的细胞内进行同源重组，提取其含有p53编码序列等位基因双拷贝的表达盒和腺病毒骨架的质粒，然后通过电穿孔手段导入HEK‑293细胞，产生具有p53编码序列等位基因双拷贝的重组腺病毒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 具有 等位基因 p53 编码 序列 重组 病毒 制备 方法 | ||
【主权项】：
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