[发明专利]一种双酶发酵催化生产莱鲍迪苷A的方法在审

专利信息
申请号: 202010447913.3 申请日: 2020-05-25
公开(公告)号: CN111662942A 公开(公告)日: 2020-09-15
发明(设计)人: 孙多龙;祁飞;孙彩军;陆晓雨 申请(专利权)人: 安徽金禾实业股份有限公司
主分类号: C12P19/56 分类号: C12P19/56;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 安徽省蚌埠博源专利商标事务所(普通合伙) 34113 代理人: 杨晋弘
地址: 239200 安*** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明涉及一种双菌发酵催化生产莱鲍迪苷A的方法,其特征在于:(1)糖基转移酶UGT76G1基因和蔗糖合酶AtSUSY基因连到pUC18质粒载体上,导转到DH5α大肠杆菌感受态细胞中,接入LB培养基,25~37℃、200~250 rpm培养10~18h;(2)按0.5%~15%接种量接到种子罐,150~400rpm,通气比0.1~1.5V/V.min,25~37℃培养5~16 h;(3)按1%~10%接种量接入发酵罐,100~1000 rpm,通气比0.2~2 V/V.min,pH 6.6~8.5,25~37℃培养20~40h;(4)OD600值达20~100时加诱导剂,浓度0.1~1.5 mmol/L;(5)发酵液压滤、重悬、破碎、压滤得粗酶液;(6)甜菊糖苷、尿苷二磷酸、磷酸缓冲液、粗酶液按质量比40‑100:1‑4:400‑600:50‑100混合,25‑40℃反应24‑48 h即可。本发明优点:一次发酵获得两种粗酶液,操作步骤少;酶活性高,生产成本低。
搜索关键词: 一种 发酵 催化 生产 莱鲍迪苷 方法
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