[发明专利]识别人程序性死亡受体1的DNA适配体及方法和应用有效
申请号: | 202010459988.3 | 申请日: | 2020-05-27 |
公开(公告)号: | CN111593053B | 公开(公告)日: | 2022-02-15 |
发明(设计)人: | 章晓联;肖振 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N15/115 | 分类号: | C12N15/115;C12N15/10;G01N33/574;G01N33/68 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 艾小倩 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种识别人程序性死亡受体1的DNA适配体及方法和应用,属于生化检测领域。利用Cell‑SELEX技术进行适配体的筛选,将构建的pDisplay/PD‑1N表面展示表达质粒转染L02细胞并用G418进行抗性筛选,获得稳定表达PD‑1N的细胞系L02‑PD‑1N。再以L02‑PD‑1N细胞为靶标进行筛选,利用寡核苷酸文库与该细胞系进行反复的多轮孵育‑洗脱‑扩增,以不表达PD‑1N的细胞进行反筛,最终通过鉴定富集的ssDNA亚文库,测序及亲和力比较,获得能高亲和性结合PD‑1N的ssDNA,即核酸适配体。本发明提供识别人PD‑1N的DNA适配体,以该适配体为核心,可利用生物素及荧光标记等用于识别细胞或组织中T淋巴细胞表面的PD‑1分子,具有用于结核及肿瘤等诊断和治疗潜在应用前景。 | ||
搜索关键词: | 识别 程序性 死亡 受体 dna 适配体 方法 应用 | ||
【主权项】:
暂无信息
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