[发明专利]异源表达纤维素酶基因CBH Ⅱ的毕赤酵母工程菌株及应用在审
申请号: | 202010534742.8 | 申请日: | 2020-06-12 |
公开(公告)号: | CN111850027A | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 钟成;沈钰清;王新光;贾士儒;李文超 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N15/62;C12N9/42;C12R1/84 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 郑海松 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明公开了两株异源表达纤维素酶基因CBHⅡ的毕赤酵母工程菌及其应用,所述的工程菌为Pichia pastoris‑cbh2,其于2019年8月保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号分别为CGMCC No.18419。通过PCR方法从里氏木霉获得葡萄糖外切酶Ⅱ(CBHⅡ),将其克隆并插入到毕赤酵母整合表达载体pPIC9K中,获得pPIC9K‑cbh2表达载体。并通过电转化将载体导入到毕赤酵母GS115中获得重组毕赤酵母菌株,用不同浓度的抗生素G418筛选含有高拷贝整合质粒的重组酵母菌株,并通过摇瓶发酵初步优化确定了最佳诱导条件,同时对纯化后的重组蛋白酶酶学性质分析。 | ||
搜索关键词: | 表达 纤维素酶 基因 cbh 酵母 工程 菌株 应用 | ||
【主权项】:
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