[发明专利]T7EI-like核酸酶反应缓冲体系、DNA错配检测方法及应用

摘要

本发明公开了一种T7EI‑like核酸酶反应缓冲体系、DNA错配检测方法及应用，涉及一种T7EI‑like核酸酶的反应缓冲溶液配方，以及利用该缓冲体系增强该类核酸酶错配识别切割能力的应用。常规的反应缓冲体系中，T7EI‑like核酸酶对插入缺失(InDel)导致的错配DNA具有较好的识别切割能力，而对单核苷酸多态性(SNP)导致的错配DNA的识别切割能力较差；本发明的反应缓冲体系中，T7EI‑like核酸酶对两类错配DNA均有良好的识别切割能力。该反应缓冲体系的核心在于其特定的缓冲溶质配比、去垢剂浓度、二价金属离子及辅助蛋白配比。该发明可应用于基因编辑效率的检测、DNA样品中错误序列的消除、基因编辑个体的筛查、样本中InDel和SNP位点的检测筛选、将InDel和SNP位点转化为分子标记进行分子辅助育种。